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全自動蛋白印跡儀的操作步驟

發(fā)布日期: 2023-12-23
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蛋白印跡儀就是用于免疫印跡試驗的儀器。蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。
 
使用全自動蛋白印跡儀的操作步驟如下:
1.準備樣品:將需要檢測的蛋白樣品進行電泳分離,并將其轉(zhuǎn)移到聚丙烯酰胺凝膠膜上。
2.準備試劑:制備蛋白印跡檢測試劑盒,并按照說明書添加相應(yīng)試劑。
3.貼膜:將聚丙烯酰胺凝膠膜轉(zhuǎn)移到印跡膜上,定位并貼緊膜。
4.洗滌:將印跡膜以及膜上的樣品進行洗滌處理,以去除潛在的非特異性結(jié)合。
5.初級抗體結(jié)合:將準備好的初級抗體添加到印跡膜上,進行結(jié)合反應(yīng)。
6.次級抗體結(jié)合:將準備好的標記有酶的次級抗體添加到印跡膜上,進行結(jié)合反應(yīng)。
7.顯色:將印跡膜與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生特異性顏色。
8.停止反應(yīng):將反應(yīng)停止劑加入印跡膜上,停止反應(yīng)。
9.圖像獲?。簩⒂≯E膜放置在全自動蛋白印跡儀中,啟動設(shè)備進行圖像獲取。
10.數(shù)據(jù)分析:對圖像數(shù)據(jù)進行分析,得出需要的數(shù)據(jù)結(jié)果
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